Тендер №0360100026226000127: Поставка наборов реагентов (Санитарный щит - Арктика)

Генетически модифицированная обратная транскриптаза (ревертаза) вируса лейкемии мышей (M-MuLV). Она отличается от M-MuLV дикого типа структурой, каталитическими свойствами и температурным оптимумом активности. Фермент проявляет РНК- и ДНК-зависимую полимеразную активность и проявляет оптимальную активность при 55 °С (активна до 65 °С). Фермент способен синтезировать первую цепь кДНК длиной до 9 т.о. и включать модифицированные основания. Скорость реакции позволяет выполнять синтез ≤15 минут, а высокая рабочая температура фермента (до 65 °C) позволяет использовать сложные матрицы и обеспечивает специфичность реакции. В набор также входит 5× ОТ-буфер, который содержит все необходимые компоненты для работы ревертазы, кроме праймеров и РНК-матрицы. Состав буфера оптимизирован для проведения эффективной реакции обратной транскрипции с широкого набора РНК-матриц. Формат набора обеспечивает гибкость при постановке реакции и позволяет проводить предварительную инкубацию РНК с праймерами. Применение: синтез первой цепи кДНК для ОТ-ПЦР и ОТ-ПЦР в режиме реального времени; синтез кДНК для клонирования; синтез кДНК сложных и длинных матриц; получение меченых кДНК зондов для микрочипов (microarray); мечение ДНК. Источник: получена из рекомбинантного штамма Е. coli, содержащего плазмиду с высокоэкспрессирующим геном ревертазы. Буфер хранения, вариант, не менее: 50 мМ Трис-HCl, pH 8,0 (при 25 °C), 100 мМ NaCl, 1 мМ ЭДТА, 5 мМ дитиотреитол, 50% (v/v) глицерин и 0,1 % (v/v) NP-40. 5× ОТ-буфер, вариант, не менее: 250 мM Трис-НCl, рН 8,3 (при 25 °C), 250 мM KCl, 20 мМ MgCl₂, 2,5 мМ каждого дезоксинуклеозидтрифосфата, 50 мМ дитиотреитол, стабилизаторы и усилители. Состав набора, вариант, не менее: - обратная транскриптаза, 100 е.а./мкл: 100 мкл (10 000 е.а.); - 5× ОТ-буфер: 1 мл; - праймер: 1×0,2 мл

ДНК-полимераза - рекомбинантный полипептид, состоящим из слитых термостабильной ДНК-полимеразы Pyrococcus furiosus (Pfu) и ДНК-связывающего белка термофильных архей вида Sulfolobus solfataricus (Sso7d). Белок Sso7d связывается с малой бороздкой двухцепочечной ДНК и дополнительно стабилизирует комплекс полимеразы с матрицей. ДНК-полимераза, обладает повышенной процессивностью, точностью синтеза, скоростью амплификации фрагментов и повышенной устойчивостью к ингибиторам ПЦР по сравнению с нативной Pfu ДНК-полимеразой. ДНК-полимераза обладает 5’→3’ полимеразной активностью, 3’→5’ экзонуклеазной активностью и синтезирует продукты с тупыми концами. ДНК-полимераза выделена из штамма E.coli, содержащего плазмиду с клонированным фрагментом ДНК, состоящим из слитых генов термостабильной ДНК-полимеразы Pyrococcus furiosus (Pfu) и ДНК-связывающего белка Sulfolobus solfataricus (Sso7d). Концентрация фермента и фасовки: 2 ед.а./мкл

Представляет собой эквимолярную смесь растворов 2'-дезоксиаденозин-5'-трифосфата (dATP), 2'-дезоксигуанозин-5'-трифосфата (dGTP), 2'-дезоксицитидин-5'-трифосфата (dCTP) и тимидин-5'-трифосфата (TTP) в виде аммонийных солей в воде. Каждый компонент смеси протестирован на присутствие эндо- и экзонуклеазной активности и свободен от примесей ДНКаз и РНКаз. Чистота каждого из нуклеодидов по данным ВЭЖХ не менее 98%. Состав: 25 mM каждого из dATP, dGTP, dCTP, TTP

ДНК полимераза I E.coli (Фрагмент Кленова). Источник: выделена из штамма E.coli, содержащего ген ДНК-полимеразы (Фрагмент Кленова). Продукт протеолиза ДНК Полимеразы I (E.coli), у которого сохраняется полимеразная и экзонуклеазная активность в направлении 3`->5`, но отсутствует экзонуклеазная активность в направлении 5`->3`. За одну единицу активности принимается количество фермента, необходимое для перевода 10 нмолей dNTP в кислотонерастворимую фракцию за 30 мин при 37°С. Оптимальный буфер: SE-буфер (Фрагмент Кленова). Буфер хранения, вариант, не менее: 10 mM KH₂PO₄(pH 7,5); 50 mM KCl; 0,5 mM EDTA; 10 mM 2-меркаптоэтанол; 50% глицерин

Набор предназначен для определения концентрации двухцепочечной ДНК на флуориметре. Благодаря селективному связыванию красителя c двухцепочечной ДНК на результаты измерения не влияет присутствие в пробе нуклеотидов, одноцепочечной ДНК, РНК, белков и других примесей. Реагенты оптимизированы для работы на флуориметре, диапазон измеряемых концентраций ДНК составляет 10 пг/мкл–100 нг/мкл для исходного образца